產品描述
本品為使用大腸桿菌XL10菌株制備的化學轉化超級感受態細胞,轉化效率超過108 cfu/μg,廣泛適用于質粒轉化、基因克隆、藍白斑篩選等用途。
XL10感受態細胞的基因型:Δ(mcrA)183Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lacTet rHte [F′proAB lacI qZΔM15 Tn10(Tet r) Amy Camr]
產品特性
1)XL10品系,具有四環素(Tetr)和氯霉素(Camr)抗性,新型克隆菌株。XL10 Chemically Competent Cell XL10化學感受態細胞
2)適合PCR產物、cDNA以及其他來源的非甲基化DNA的高效轉化。
3)endA1,RecA1突變,確保外源DNA在宿主菌中的穩定性,有利于高質量質粒DNA提取。
4)Hte基因型,增強大片段DNA轉化效率,并使宿主菌細胞生長速度大幅度提高。
5)可用于對重組質粒進行藍白斑篩選。
6)轉化效率≥108 cfu/μg pUC19 DNA。
7)無外源質粒DNA殘留。
XL10 Chemically Competent Cell XL10化學感受態細胞
運輸與保存方法
干冰運輸。
XL10感受態細胞-80℃保存,pUC19質粒-20℃保存。有效期半年。
注意事項
1)請勿將本品置于-20℃或液氮中保存
2)感受態細胞冰水浴中解凍后應立即使用。
3)待轉化DNA加入體積不要超過感受態細胞體積的1/10。
4)待轉化DNA加入感受態細胞后,請勿用移液槍吹打,輕輕彈勻即可。
5)為確保*高效率轉化,整個操作過程應盡量輕柔。
6)為了您的健康,實驗操作時請穿實驗服和帶一次性手套。XL10 Chemically Competent Cell XL10化學感受態細胞
使用說明
1)將感受態細胞從-80℃中取出,置于冰水浴中融化。
2)將待轉化DNA加入到100 μl感受態細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育30分鐘。
3)將離心管置于42℃水浴,不要晃動,準確熱激90秒后,立刻置于冰水浴中,靜置2-3分鐘。
4)向離心管中加入900 μl LB或SOC培養基,37℃水浴鍋中靜置10分鐘。
5)150 rpm, 37℃振蕩培養45分鐘,使菌體復蘇,抗性基因表達。
6)2,500 g離心5分鐘,去掉900 μl上清。用剩余培養基將菌體重懸,用無菌涂布棒在含有正確抗性的平板上輕輕涂勻。室溫正置10分鐘。待菌液被平板吸收后,37℃倒置培養過夜。
XL10 Chemically Competent Cell XL10化學感受態細胞【注】:也可直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存,一周之內都可重新涂板。