產品描述
XL10-Gold化學感受態細胞是經特殊工藝處理得到的感受態細胞,特別適合于大分子量DNA的高效轉化。具有四環素和氯霉素抗性,使用Puc19質粒測得其轉化效率達108cfu/μg,主要具有如下特點:
① Hte表型可增強較大分子量質粒和連接產物的高效轉化;
② 具有限制性內切酶缺陷性,更利于克隆 DNA 的穩定和高純度質粒 DNA 的提取;
XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化學感受態細胞③ 更適于質粒文庫的構建;
④ 具有lacIqZΔM15,可用于藍、白斑篩選。
本品基因型:
TetrΔ(mcrA)183Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [F′proAB lacIqZΔM15 Tn10 (Tetr) Amy Camr]。
XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化學感受態細胞
運輸與保存方法
干冰運輸。
XL10-Gold化學感受態細胞-80℃保存,pUC19質粒-20℃保存。有效期半年。不能保存于液氮!
注意事項
1)感受態細胞應保存在-80℃,不可反復凍融和放置時間過長,以免降低感受態細胞的轉化效率。
2)整個轉化操作,嚴格根據相應溫度及無菌條件要求進行。
3)為確保*高轉化效率,整個操作過程應盡量輕柔,并保持低溫,且每次轉化感受態使用量,不低于100μl。
4)為防止轉化不成功,可以保留部分連接反應液,以重新轉化,*低化實驗可能遇到的風險。
使用方法XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化學感受態細胞
1)取100 μl感受態細胞置于冰浴中融化。
2)向100μl感受態細胞懸液中加入0.1-50ng(<10μl /100μl感受態)目的DNA或2μl連接產物,輕輕旋轉離心管以混勻內容物,在冰浴中靜置30min。
3)置于42℃水浴中熱激30s,然后快速將管轉移到冰浴中,冷卻2-3min,該過程不要搖動離心管,否則會降低轉化效率。
4)向離心管中加入900μl 42℃預熱的無菌NZY+培養基(不含***),混勻后置于37℃搖床振蕩培養1h(225-250rpm),目的是促使菌體復蘇。
【注】:此步也可用LB培養基(不含***)進行菌體復蘇。
5)取上述≤200μl轉化產物涂至含有相應***的LB固體平板上,將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。
【注】:如需做藍白斑篩選,需至少孵育17h,以充分顯色。XL10-Gold Chemically Competent Cell XL10-Gold化學感受態細胞1501 檸檬酸鋰 四水合物, 99.99% metals basis L113839 美國Amresco C6H8O7·3Li 大量 g/mg 美國/中國 上海滬震 常溫,避光 12個月
1502 美國Amresco 大量 g/mg 美國/中國 上海滬震 常溫,避光 12個月
1503 美國Amresco 大量 g/mg 美國/中國 上海滬震 常溫,避光 12個月
1504 L-來蘇糖, 99% L115557 美國Amresco C5H10O5 大量 g/mg 美國/中國 上海滬震 常溫,避光 12個月
1505 L-(-)-半乳糖, 99% L115558 美國Amresco C6H12O6 大量 g/mg 美國/中國 上海滬震 常溫,避光 12個月
1506 L-(-)-葡萄糖, 98% L115560 美國Amresco C6H12O6 大量 g/mg 美國/中國 上海滬震 常溫,避光 12個月
1507 乳酸銀, 90% L120800 美國Amresco C3H5AgO3 大量 g/mg 美國/中國 上海滬震 常溫,避光 12個月
1508 昆布三糖, 90% L121033 美國Amresco C18H32O16 大量 g/mg 美國/中國 上海滬震 常溫,避光 12個月
1509 果聚糖, L121035 美國Amresco 大量 g/mg 美國/中國 上海滬震 常溫,避光 12個月
1510 D-乳糖醇 一水, 99% L121088 美國Amresco C12H24O11 · H2O 大量 g/mg 美國/中國 上海滬震 常溫,避光 12個月
1511 毛花苷C, 95% L121090 美國Amresco C49H76O20 大量 g/mg 美國/中國 上海滬震 常溫,避光 12個月
1512 Lys-Tyr-Lys acetate salt, ≥97% (HPLC) L121355 美國Amresco C21H35N5O5·xC2H4O2 大量 g/mg 美國/中國 上海滬震 常溫,避光 12個月