BL21 (DE3) pLysS Chemically Competent Cell BL21 (DE3) pLysS化學感受態細胞
產品描述
BL21 (DE3) pLysS化學感受態細胞是大腸桿菌BL21(DE3)pLysS經特殊工藝處理得到的感受態細胞,可用于DNA的熱擊轉化。該菌株攜帶pLysS質粒,具有氯霉素抗性(Camr),PLysS含有表達T7溶菌酶的基因,能夠降低目的基因的背景表達水平,但不干擾目的蛋白的表達。
本品適合毒性蛋白和非毒性蛋白的表達。使用pUC19質粒檢測,本品轉化效率可達107。BL21 (DE3) pLysS Chemically Competent Cell BL21 (DE3) pLysS化學感受態細胞
基因型:F- ompT hsdSB(rB - mB -) gal dcm(DE3)pLysS Camr。
運輸和保存方法
干冰運輸。
BL21 (DE3) pLysS化學感受態細胞于-80℃保存,pUC19質粒≤-20℃保存。有效期半年。不可于液氮中保存!
注意事項
1)感受態細胞冰水浴中解凍后應立即使用。
BL21 (DE3) pLysS Chemically Competent Cell BL21 (DE3) pLysS化學感受態細胞2)待轉化DNA加入體積不要超過感受態細胞體積的1/10。
3)待轉化DNA加入感受態細胞后,請勿用移液槍吹打,輕輕彈勻即可。
4)為確保*高效率轉化,整個操作過程應盡量輕柔,并保持低溫。
5)本品應于-80℃保存,請勿將感受態細胞儲存于-20℃或液氮中保存。
6)為了您的**和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法
1)將感受態細胞從-80℃中取出,置于冰水浴中融化。BL21 (DE3) pLysS Chemically Competent Cell BL21 (DE3) pLysS化學感受態細胞
2)將待轉化DNA加入到100 μl感受態細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育30分鐘。
3)42℃水浴,不要晃動,準確熱激90s后,立刻置于冰水浴中,靜置2-3分鐘。
4)向離心管中加入900 μl LB或SOC培養基,37℃水浴鍋中靜置10分鐘。
5)150 rpm, 37℃振蕩培養45分鐘,使菌體復蘇,抗性基因表達。
6)2,500 g離心5分鐘,去掉900 μl上清。用剩余培養基將菌體重懸,用無菌涂布棒在含有正確抗性的平板上輕輕涂勻。室溫正置10分鐘。待菌液被平板吸收后,37℃倒置培養過夜。
【注】:也可直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存,一周之內都可重新涂板。BL21 (DE3) pLysS Chemically Competent Cell BL21 (DE3) pLysS化學感受態細胞