細胞因子添加中不含載體蛋白或別的添加劑,而且通常以*少數的鹽來進行凍干處理,因此微量的細胞因子在凍干過程中會堆積于管內,構成很薄或不行見的蛋白層。 我們建議在收到商品后,必須在開蓋前先離心,使粘在管蓋或管壁上的蛋白集合于管底(此刻能否見到白色沉積均屬正常景象)。 細胞因子添加離心:高速離心20-30秒,或低速離心5分鐘。 溶解時不行振動,防止因化學鍵的開裂形成蛋白失活,可參加恰當的溶劑輕搖并靜置一段時間,待細胞因子徹底溶解后運用。 細胞因子溶解時溶劑的選擇: 請求用去離子水溶解的商品,細胞因子添加必須不行用鹽溶液,防止過高的鹽濃度形成蛋白不行逆的分出; 請求用鹽溶液溶解的商品,請依照細胞因子說明書上的濃度,相同也是為了防止過高的鹽濃度。 溶解:細胞因子用去離子水或其它緩沖液溶解至說明書請求的濃度 (通常為 0.1-1.0 mg/mL,如10ug的商品,需用10uL-100uL的去離子水或緩沖液溶解)。 工作液在4℃可保留1周,如需長時間保留,則需分裝凍存于-20℃ (留意:不行凍存于-80℃)。 分裝時每管中工作液的體積是一次試驗的用量,以完成每次試驗用完一只工作液,防止反復凍融導致蛋白活性的下降。 細胞因子添加分裝和儲存:細胞因子蛋白溶解后可根據自己的試驗需求進一步稀釋成工作液,稀釋可用RPMI 1640、DMEM或PBS等溶液,其間富含5-10%的FCS(小?;?a href="http://fjnetcom.com/shuzbio_Product_2026266604.html" class="keyword_inherit" name='keyword_inherit' target='_blank'>胎牛血清)或0.5 %的BSA(牛血清白蛋白)來穩定蛋白。
人膀胱癌細胞 HT-1376 7 20-1 MEM+10%FBS+1%P/S 貼壁 小鼠海馬神經元細胞 HT22 6 30-2&35-2 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁 人結腸癌細胞 HT-29 11 6-4&5-2 McCOY's 5A +10%FBS 人眼小梁網細胞 HTMC 5 10-2 & 29-4 DMEM/F-12+15%FBS HU778 1 26-5 人肝癌細胞 huh-7 19 28-3&2-5 DMEM+10%FBS+1%P/S+1%NEAA 貼壁 人肝癌細胞 細胞因子添加huh-7.5 6 29-4 & 30-1 1640+10%FBS+1%P/S 貼壁 人肝癌細胞 huh-7.5.1 10 31-3 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁 人膽管癌細胞 HUH28 9 28-1 &7-5&8-1 DMEM+10%FBS+1%P/S 貼壁 人皮膚T**瘤細胞 HUT-102 8 32-4 1640+10%FBS+1%P/S 懸浮 人十二脂腸腺癌 HUTU-80 6 22-4 MEM+10%FBS+1%P/S 貼壁 人靜脈內皮細胞 HUV-EC 8 5-2 & 25-2 F-12K+0.1 mg/ml 肝素+0.03-0.05 mg/ml 內皮細胞生長因子+10%FBS
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