霍亂弧菌顯色培養基
(Chromogenic Vibrio Cholerae Agar)
用 途:
霍亂弧菌顯色培養基用于水產品及食物中毒樣品中霍亂弧菌的分離和鑒定。
霍亂弧菌顯色培養基原 理:
蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;蔗糖為可發酵的糖類;抑菌劑抑制大部分非霍亂弧菌**,氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑;色素與霍亂弧菌所具有的酶發生特異性反應,水解底物,釋放出顯色基團,在淡黃色平板上產生綠-藍綠色的菌落。
霍亂弧菌顯色培養基配方(每升):
蛋白胨 15g
酵母膏粉 5g
蔗糖 10g
氯化鈉 5g
抑菌劑 5g
瓊脂 13g
色素 3.1g
*終pH 9.0±0.2
霍亂弧菌顯色培養基使用方法
1、取瓶內干粉56.1克,用100ml蒸餾水或純水溶解,可按比例擴增或縮小。攪拌加熱煮沸至完全溶解,不需高壓**,冷至約50℃,傾注**平皿。
2、以無菌操作取檢樣25 g(mL),加入堿性蛋白胨水225 mL,用旋轉刀片式均質器以8 000 r/min均質1 min,或拍擊式均質器拍擊2 min,制備成1:10的均勻稀釋液。如無均質器,則將樣品放入無菌乳缽中磨碎,然后放在500 mL的**容器內,加225 mL堿性蛋白胨水,并充分振蕩。
3、增菌:將上述1:10稀釋液于36 ℃±1 ℃培養6h~8h,如有需要可進行二次增菌。
4、分離
在增菌液中用接種環取一環,于霍亂弧菌顯色平板上劃線分離,于36 ℃±1 ℃培養18 h~24 h。
5、通過驗證試驗進一步確認假定性霍亂弧菌,如氧化酶、革蘭氏染色等。
質量控制:
本品傾注平皿后呈淡黃色,下列菌株接種后36±1℃培養18-24小時生長情況如下表:
霍亂弧菌顯色培養基注:*后的鑒定須做補充試驗。
外觀:
脫水培養基:淺黃色具流動性粉未。
制備好平板:淡黃色的膠。
儲存條件和保質期:
脫水培養基:10-30℃,保質期二年。 制備好平板: 2-8℃,*多保存兩周。
結果判斷
霍亂弧菌顯色培養基1 沙氏液體培養基 用于**的增菌培養,還用于一次性使用衛生用品**定性檢測。
2 沙氏瓊脂培養基 用于**的分離培養,還用于一次性使用衛生用品**菌落總數檢測。 國標
3 霉菌液體培養基 胨提供碳源和氮源;酵母膏粉提供B族維生素;葡萄糖提供能源;磷酸二氫鉀為緩沖劑;硫酸鎂提供必須的微量元素;氯霉素可抑制**的生長。
4 馬鈴薯瓊脂 用于霉菌的培養 國標
5 馬鈴薯葡萄糖瓊脂 (PDA) 供霉菌和酵母菌計數及分離培養。 國標 ISO
6 改良馬丁瓊脂培養基(**營養瓊脂培養基) 用于**培養及藥品和生物制品無菌檢查用 藥典
7 改良馬丁培養基 (**培養基) 用于**培養及藥品和生物制品無菌檢查用。 藥典
8 高鹽察氏培養基 用于飼料中霉菌的檢驗 國標
9 察氏培養基 用于培養能以硝酸鹽作為**氮源的**和**,及青霉和曲霉等霉菌的分離培養和形態鑒別。
10 玫瑰紅鈉瓊脂培養基 藥典
11 孟加拉紅培養基(虎紅瓊脂) 供霉菌和酵母的計數、分離和培養用(GB/T4789.15-2010和化妝品衛生規范微生物檢驗方法2007版)。 國標
12 亞利桑那菌瓊脂 用于亞利桑那菌選擇性分離培養 FDA標準 藥典