干粉型SOC培養基數量: 大量 保質期: 一年 保存條件: 常溫避光保存
干粉型SOC培養基注意事項:提取過程應盡量在低溫環境中進行,蛋白質的去除以酚/混合效果*好,可以采取多次抽提盡量將蛋白質除干凈,在沉淀DNA 時通常使用冰乙醇,在低溫條件下放置可使DNA沉淀完全。同時反應中加入的鹽濃度一定要控制好,當加入的鹽溶液濃度太低時,干粉型SOC培養基只有部分DNA形成DNA鉀鹽而聚合,這樣就造成DNA沉淀不完全,當加入的鉀溶液濃度太高時,其效果也不好。在沉淀的DNA中,由于過多的鹽雜質存在,影響DNA的酶切等反應,必須要進行洗滌或重沉淀。一般情況下都是加入的*終濃度達0.1~0.25mol/L為宜。一、干粉型SOC培養基設計兩對引物,A(1上游,2下游),B(3上游,4下游),A的下游引物和B的上游引物至少有15個堿基的重疊部分。A,B基因擴增出來后,回收純化。用高真酶擴增。 二、然后將A、B的回收產物1:1加入到PCR體系中,作為模板,用1,4引物拼接A、B,形成融合基因。 干粉型SOC培養基分子生物學實驗技術都有哪些:PCR 分子克隆 核酸電泳、瓊脂糖凝膠電泳 測序 DNA,RNA 提取 轉化外源DNA 體外轉錄、逆轉錄 cDNA文庫構建 原位雜交、酵母雙雜交、差減雜交、扣除雜交 藍白斑篩選、***篩選 基因工程技術大部分都是依據分子生物學原理設計出來的.
滬公網安備 31011702004356號