ELISA試劑盒注意事項和操作過程
ELISA試劑盒注意事項
1. 此試劑為體外檢測試劑,效期內運用,試劑應視為感染物,不同總批號的試劑不能混用。
2.運用前應將盒內各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3.濃縮洗刷液呈現結晶后,請于37℃孵育15分鐘。
4.濃縮樣品稀釋液呈現結晶后,請于37℃孵育15分鐘
5.若24小時內進行試驗,標本可存放于2~8℃。不需及時試驗,標本-20℃保存,防止反復凍融。
6.在反復清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將下降**度,造成吸光度違背的假像。
7.加樣結束后,應注意細微搖擺微孔反響條,以便使孔中的液體充沛混勻。
8.試劑盒保存于2~8℃,請勿冷凍,有效期請見盒內標明。
ELISA試劑盒操作過程
1.取出酶標板,設空白孔,按照次第對應別離參加100μl的規范品于空白微孔中(空白孔視為0號規范品,用醫用
蒸餾水代替)
2、別離標記樣品編號,參加100μl的稀釋樣品于空白微孔中(不同的樣本選用不同的吸頭)。
3、將酶標板置于37℃溫育30分鐘;
4、將酶標板板取出,將其間的液體甩去,每個孔中悉數加滿使用洗刷液后,當即甩去液體;
5、每個孔中加滿使用洗刷液后,細微振搖酶標板30秒后將孔中的使用洗刷液甩去,在吸水紙大將酶標板拍干。
6、重復第5個過程5次,在吸水紙大將酶標板拍干。
7、在規范品孔和樣品孔中參加100μl的酶標巧合溶液。
8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。
9、將酶標板取出,將其間的液體甩去,每個孔中悉數加滿使用洗刷液后,當即甩去液體。
10、每個孔中再次加滿洗刷使用液后,室溫細微振搖酶標板30秒后將孔中的使用洗刷液甩去,在吸水紙大將酶標板
拍干。
11、重復第5個過程5次,在吸水紙大將酶標板拍干。
12、在每個孔中參加底物A 50μl后當即參加底物B 50μl。悄悄振動混勻。(A液、B液選用不同的吸頭加樣)
13、將酶標板置于37℃避光溫育反響15分鐘。
14、每個微孔中參加50μl的停止液,悄悄振動混勻。
15、在酶標儀上,450nm處測定OD; 顯色后,15分鐘內進行測定。
16、依據制備的規范曲線,核算樣本含量